Биз ПЦР эксперименттерин да жасап жатабыз, эмне үчүн натыйжалар башкаларга караганда ар дайым начарлап кетет?

Биз ПЦР эксперименттерин да жасап жатабыз, эмне үчүн натыйжалар башкаларга караганда ар дайым начарлап кетет?

Лабораторияда, башка адамдардын ПТРин караңыз, күчөтүү эффективдүүлүгү жогору, электрофорез тилкеси кемчиликсиз жана өзүлөрүнө караңыз, узак убакытка чейин жасоо кыйын, реакция абдан жакшы, жалган оң сыноонун натыйжасы ... маселе?

Биздин өнөктөштөрдүн көпчүлүгү ар кандай көйгөйлөргө туш болушкан деп эсептейм. ПТР эксперименттеринде дубалга туш болгондо, реакция тутумундагы факторлорду аң-сезимсиз талдайбыз, бирок көп учурда эксперименттерде сарпталуучу материалдардын маанилүү таасирин эске албайбыз.

Сиздин ПТР натыйжаңыз туура эмес, себеби ПКО чыгымдалуучу материалдары олуттуу себеп болушу мүмкүн. Бир жагынан, чыгымдалуучу материалдардын микро булганышы же ингибиторлордун киргизилиши тажрыйбалык булганышка алып келет; Башка жагынан алганда, сарпталуучу материалдарды туура эмес тандоо, ошондой эле эксперименталдык натыйжаларга зыян келтирет.

Маселе кайрадан келип чыгат. ПКР чыгымдалуучу материалдарынын түрлөрү көп, андыктан эксперименттин жылмакай болушун кантип туура тандап алса болот? Кандай көйгөйлөргө көңүл буруш керек? Коркпо, бүгүнI Көп жылдык тажрыйба менен айкалыштырганда, ПКО чыгымдалуучу материалдарды тандоодо көп кездешкен көйгөйлөрдү чечип, сизге жардам берет деп ишенем.

 

Q1: Эмне үчүн ПТР чыгымдалуучу материалдары көбүнчө PP материалынан жасалат?

Хуида: ПТР жабдыктары адатта реагенттер же үлгүлөр менен түздөн-түз байланышта болгондуктан, полипропилен (PP) материалдары биологиялык жактан инерттүү, биомолекулярдык клеткаларга карманышпайт, ошондой эле химиялык толеранттуулукка жана температурага чыдамдуулукка ээ (121 дарегинде автоклап кылса болот) ° C, ошондой эле жылуулук айлампасынын жүрүшүндө температуранын өзгөрүшүнө туруштук бере алат).

 

Q2: ПКР түтүктөрүнүн / плиталарынын ар кандай өлчөмдөрүн кантип тандасам болот?

HUIDA: Тандоонун максаты: эксперименталдык талаптарга ылайык керектүү азыктарды тандоо. ПТР түтүгүнүн көлөмүнүн көпчүлүгү ПТР реакциясынын талаптарына жооп бере алат. Ушунун негизинде алгач көлөмү аз түтүктү тандап алуу сунушталат. Төмөнкү көлөмдөгү реакция түтүгүндө / плитасында үстүнкү мейкиндик кичинекей болгондуктан, жылуулук өткөрүмдүүлүгү жакшырып, буулануу азаят. Ошол эле учурда, өтө көп же өтө эле аз үлгүлөрдү кошуудан алыс болуш керек. Өтө көп болсо, жылуулук өткөрүмдүүлүгүнүн төмөндөшүнө, төгүлүшүнө жана кайчылаш булгануусуна алып келиши мүмкүн, ал эми өтө аз өлчөмү буулануунун жоголушуна алып келиши мүмкүн.

Жалпы реакциялык түтүктөрдүн мүнөздөмөлөрү жана көлөмү:

Жалгыз / курама түтүк: 0,5мл, 0,2мл, 0,15мл

96 кудуктуу табак: 0,2мл, 0,15мл

384-чуңкур табак: 0,04мл

 

Q3: Тандоонун саны аз болгондо, мен бир түтүк же курама түтүктү тандайм, бирок эмне үчүн кээ бирлеринин жалпак капкактары бар, ал эми кээ бирлери томпок капкагы бар?

Хуида: Үлгүнүн саны аз болгондо, жалгыз түтүк же курама түтүккө артыкчылык берилет. Бирок, реакциянын көлөмү чоң болгондо, бир түтүк басымдуулук кылат жана көлөм 0,5 млге жетиши мүмкүн. Жана жалпак мукабанын жана томпок капкактын ар биринин артыкчылыгы бар, төмөнкү маалыматтарга шилтеме берсе болот.

Бир түтүк: 0,2мл жана 0,5мл; Үлгүнүн санын ийкемдүү тандай алат.

Туташтыруучу түтүк: 0.2ml же 0.15ml милдеттүү эмес; 8 же 12 түтүкчө кеңири тараган.

Жалпак капкак: qPCR үчүн так флуоресценттик сигналдын берилишин камсыздай алат; Белгилерди жазуу оңой.

Томпок каптама: басымдын натыйжасында реакция түтүгүнүн деформациясын азайтуу үчүн ПТР приборунун ысык капкагы менен байланышуу; Бирок, ал флуоресценциялык сигналдын таралышына таасирин тийгизип, qPCR тажрыйбасына колдонууга болбойт.

 

4-суроо: Эмне үчүн кээ бир ПТР плиталарында юбка бар, ал эми айрымдарында жок?

Хуида: Чындыгында, ПТР табакчасынын этеги автоматика тиркемелерине жакшыраак ыңгайлашып, шайманга туруктуу колдоо жана механикалык туруктуулукту камсыз кылып, пипеткалоо процессинде жогорку туруктуулукту камсыз кылат.

ПТР плиталары көбүнчө этек эмес, жарым этек жана толук этек болуп бөлүнөт.

Ансыз Табак: PCR машиналарынын көпчүлүгүнө же qPCR машиналарына ылайыктуу, бирок автоматташтыруу тиркемелери үчүн эмес. Пипеткалоо процессинде туруктуулук жогору эмес, андыктан аны плиталардын колдоосу менен колдонуу керек.

Жарым юбка четиндеги тактайча: этикеткага же штрих-код колдонууга жана автоматтык түрдө колдонууга ылайыкташтырылып, pipetting туруктуулугуна ээ.

Толук юбка плитасы: автоматташтырылган эксперименталдык колдонмолор үчүн абдан ылайыктуу, ошондой эле штрих-коддун этикеткасына жана колдонулушуна ылайыкташтырылышы мүмкүн. Ал жакшы механикалык күчкө ээ, томпок модулдагы ПТР инструментинде колдонсо болот жана тамчылатуу процессинде жогорку туруктуулукка ээ.

 

Q5 :ПКР плиталары үчүн эмне үчүн бурчтар менен этикеткалар бирдей эмес?

Хуида: Бул бурчту кесүүнүн жана белгилөөнүн таасирине жараша болот.

Бурчту кесүү: ПКО табактын бурчтук кесүү абалын тандоо оңой жайгаштырууга ылайыктуу шаймандын талаптарына жараша болот.

Идентификация: ПЦР плиталарындагы ариптик-цифралык маркерлер айрым Уэллдерди жана үлгүлөрдүн жайгашкан жерлерин аныктоого жардам берет. Көбүнчө оймо-чиймеленген түстүү санариптик логотип же чегилген логотип үчүн. Айрым автоматташтырылган колдонмолор үчүн, басылып чыккан жана белгиленген реакция плиталары жакшы жабылган.

 

6-Q: Эмне үчүн кээ бир ПТР плиталары томпок, ал эми башкалары жалпак? Кайсынысы жакшы?

Хуида: Эң жакшысы эмне. Кеңири таралган ПКР плиталарынын эки түрү бар: тегиз тешик маржасы жана жогорку тешик маржа.

Көпчүлүк ПТР аппараттарына жарактуу жалпак тешик маржалуу реакция плитасы.

Тешиктин четтери көтөрүлүп кеткен реакция плиталары мембрананын жабылышын жеңилдетет жана үлгүлөрдүн ортосундагы кайчылаш булгануу коркунучун азайтат.

 

Хуида ПТР продукциясын өндүрүү жана кайра иштетүү боюнча көп жылдык тажрыйбага ээ жана тармактын жогорку стандарттары. Продукциянын түрү бай жана ПТРдин эксперименталдык колдонмолорунун басымдуу көпчүлүгүнө жооп берет. Келип, эксперименталдык колдонмолоруңузга туура өнүмдөрдү тандаңыз.

谷歌推广疫情产品PCR


Билдирүү убактысы: Июнь-03-2021